Nasceu em Tóquio, Japão. Mitsuishi se formou no colegial em 1986 e ingressou na Academia Katsuta Seiyū. Enquanto frequentava a academia, ela começou a trabalhar em período parcial como uma garota de elevador no prédio Sunshine 60. Posteriormente, ela encontrou uma posição como senhora do escritório, mas, por ter demorado muito tempo, foi forçada a sair. Em 1989, Mitsuishi made seu seiyū demas como Tomoyo no OVA Ace o Nerae! Estágio final. Ela se tornou uma celebridade instantânea com seu papel de Usagi Tsukino quando estreou em 1992, e sua popularidade aumentou novamente com seu papel como Misato Katsuragi na série de TV anime Neon Genesis Evangelion. Ela é considerada uma das seiyū mais influentes no negócio; a adaptação animada de Ebichu foi amplamente produzida por causa de seu interesse no projeto. Mitsuishi é casado e tem uma filha. Em uma digressão aos dias de OL, ela monta uma motocicleta Yamaha FZ250 Phaser. Mitsuishi é freelancer e ex-membro da empresa Arts Vision. @kotochawanmoon