Samuel "Sam" Winchester é um caçador, junto com seu irmão mais velho, Dean. Ele é um dos principais protagonistas de Supernatural. Tem sido argumentado que ele é o mais esperto dos irmãos Winchester, embora o próprio Sam discorde. Com o tempo, Sam aceitou o estilo de vida Caça e se sacrificou repetidamente pelo bem maior, destacando sua natureza desinteressada. Os irmãos Winchester caçam criaturas místicas e lendas urbanas como os folclóricos Bloody Mary e Shapeshifters. Geralmente, cada episódio gira em torno de uma estrutura relativamente uniforme que os irmãos encontram um caso e o resolvem. Embora o irmão de Sams, Dean, tenha sido o principal responsável pela coleta de pistas de caça neste momento, os episódios de pré-reconhecimento e telecinesia de Sams logo os direcionam para onde várias de suas caçadas ocorrem. Sam é um sénior da Universidade de Stanford que está a candidatar-se à faculdade de direito. Sam também tem uma namorada, Jessica Moore, com quem ele mora e planeja secretamente se casar. Uma noite, Dean vem ao apartamento de Sams para procurar sua ajuda depois que o pai desaparece; embora relutante a princípio, Sam eventualmente acompanha seu irmão.