Tsunade é a neta do Primeiro Hokage. Ela é uma das lendárias Sannin. Após sua falha na invasão de Konoha, Orochimaru se aproxima de Tsunade para fazê-la curar seus braços. Enquanto ela inicialmente se recusa, Orochimaru se oferece para reviver Dan e Nawaki em troca de curar seus braços. Intrigado, Tsunade resta uma semana para considerar o assunto. Depois de conhecer Uzumaki Naruto, Tsunade começa a se lembrar dos sonhos de seus dois entes queridos e o quanto eles amavam a vila de Konoha. Enquanto ela deseja vê-los novamente, Tsunade finalmente é incapaz de ajudar Orochimaru, suas esperanças de destruir Konoha forte demais para ignorar. Determinada a proteger a vila que seus entes queridos mantinham estimada até o fim de suas vidas, Tsunade luta com Orochimaru e finalmente o derrota. Tendo aceitado o título de Quinto Hokage, Tsunade retorna a Konoha depois. Desde que se tornou Hokage, Tsunade atuou principalmente como uma fonte de tarefas e mobiliza as forças de Konohas quando necessário. Além disso, Tsunade desempenha um papel importante na cura dos ferimentos mais graves que ocorrem sobre aqueles que ela envia em missões. No final da Parte I, Haruno Sakura se torna aprendiz de Tsunades. A habilidade de marca registrada de Tsunades é sua força desumana, derivada de seu excelente controle de chakra. Armazenando o chakra e liberando-o no ponto de contato, ela pode aumentar sua força até o ponto em que pode romper pedras com as próprias mãos. Ela também é uma médica-nin extremamente talentosa e pode curar feridas que muitos outros considerariam impossíveis. Como resultado de seu controle de chakra e suas habilidades médicas, Tsunade criou uma forma de regeneração. Então, ela realmente tem quase 50 anos, mas parece que ela tinha vinte anos.